APPLICATION OF A KIT-FREE ECOTOXICITY ASSAY BASED ON THE LUMINESCENCE OF VIBRIO FISCHERI IN THE TESTING OF SUNSCREENS

Resumen

Uno de los más usados bioensayos de ecotoxicidad se basa en la luminiscencia de Vibrio fischeri, para el que existen kits comerciales como el de Microtox® y varios otros. Sin embargo, este ensayo no puede ser siempre aplicado por varias razones. Por un lado, su protocolo no puede ser fácilmente adaptado o modificado, y además, requiere la adquisición continua del kit y la disponibilidad de equipamiento especializado o por lo menos, de un luminómetro. Como una alternativa versátil, este artículo describe un protocolo optimizado que no requiere el uso de un kit, denotado como “Macrotox”, que permite un rango amplio de periodos de tratamiento (por ejemplo, 1, 3, 7, 12, 24, 30 y 36 h), siguiendo los efectos en la luminiscencia y proliferación de. V. fischeri. Aunque el protocolo optimizado envuelve tratamientos de 1 mL, puede ser fácilmente adaptado para usar otros volúmenes y tiempos. Es importante destacar que, para evaluar los efectos en la luminiscencia, solo una cámara digital es necesaria para tomar las fotografías en la
oscuridad, las que son luego analizadas mediante el software de acceso abierto Image J. Para la evaluación de los efectos sobre la proliferación, las densidades celulares son estimadas mediante mediciones espectrofotométricas. En este artículo, ambos métodos Microtox® y Macrotox fueron aplicados para la determinación de los niveles de ecotoxicidad de un bloqueador comercial y una loción humectante como control. Sin embargo, el protocolo Macrotox descrito puede ser similarmente aplicado para el ensayo
ecotoxicológico de cualquier otra muestra.